Perguntas comuns e considerações em cromatografia gasosa

Gas Chromatography Principles

1. Quais são as características da cromatografia gasosa?

R: A cromatografia gasosa é um tipo de cromatografia que usa gás como fase móvel. Suas vantagens para separação e análise são as seguintes: 1. Alta sensibilidade: pode detectar substâncias tão pequenas quanto 10-13 gramas, sendo adequada para analisar impurezas em traços em gases ultrapuros, monômeros de alto peso molecular e venenos em traços no ar. 2. Alta seletividade: pode separar eficazmente isômeros e isótopos com propriedades muito semelhantes. 3. Alta eficiência: pode separar amostras complexas em componentes individuais. 4. Alta velocidade: a análise geral pode ser concluída em apenas minutos, facilitando o controle de produção e a orientação do processo. 5. Ampla gama de aplicações: pode analisar tanto gases e líquidos de baixo teor quanto gases e líquidos de alto teor, independentemente do teor dos componentes. 6. Pequeno volume de amostra necessário: em geral, alguns mililitros são usados para amostras gasosas, e alguns microlitros ou dezenas de microlitros para amostras líquidas. 7. O equipamento e a operação são relativamente simples, e o instrumento é barato.

2. Qual é o princípio de separação da cromatografia gasosa? Resposta: A cromatografia gasosa é um método de separação física. Ela utiliza a pequena diferença no coeficiente de distribuição (solubilidade) dos componentes da substância analisada entre duas fases diferentes. Quando as duas fases estão em movimento relativo, essas substâncias são distribuídas repetidamente entre as duas fases, fazendo com que a pequena diferença original de propriedades produza um efeito grande, separando assim os diferentes componentes.

3. O que é cromatografia gasosa? Quantas categorias existem? Resposta: Todas as técnicas de cromatografia que usam gás como fase móvel são geralmente chamadas de cromatografia gasosa. Em geral, podem ser classificadas segundo os seguintes aspectos: 1. Classificação pelo estado de agregação da fase estacionária: (1) Cromatografia gasoso-sólida: a fase estacionária é um adsorvente sólido, (2) cromatografia gasoso-líquida: a fase estacionária é um líquido depositado sobre a superfície do suporte.

2. Classificação por princípios físicos e químicos de processo: (1) Cromatografia de adsorção: cromatografia que usa as diferenças nas propriedades de adsorção física de diferentes componentes sobre uma superfície sólida adsorvente para a separação. (2) Cromatografia de partição: cromatografia que usa os diferentes coeficientes de distribuição dos componentes entre duas fases para realizar a separação. (3) Outras: cromatografia de troca iônica baseada no princípio de troca iônica; eletrocromatografia baseada no efeito eletrocinético de coloides; cromatografia térmica baseada no desenvolvimento de variações de temperatura, etc.

3. Classificação pelo tipo de fase estacionária: (1) Cromatografia em coluna: a fase estacionária está contida na coluna cromatográfica. Colunas empacotadas, colunas vazias e colunas capilares pertencem todas a esta categoria. (2) Cromatografia em papel: usa-se papel filtro como suporte. (3) Cromatografia em filme fino: a fase estacionária é um filme fino prensado a partir de pó.

4. Classificação segundo o princípio do processo cinético: pode ser dividida em três tipos: método de eluição, método de substituição e método de contrapressão.

4. Qual é o processo de um dispositivo simples de análise por cromatografia gasosa? Resposta: O processo de um dispositivo simples de análise por cromatografia gasosa é basicamente composto por quatro partes: 1. Fonte de gás 2. Dispositivo de injeção de amostra 3. Coluna cromatográfica 4. Detector e registrador

5. Quais são alguns termos comuns e conceitos básicos em cromatografia gasosa? Resposta: 1. Fase, fase estacionária e fase móvel: uma porção homogênea de um sistema é chamada de fase. Nas separações cromatográficas, a fase estacionária é chamada de fase estacionária; o fluido que se move através ou ao longo da fase estacionária é chamado de fase móvel. 2. Pico cromatográfico: as curvas que aparecem no registrador depois que uma substância passa pela coluna cromatográfica e entra no detector são chamadas de picos cromatográficos. 3. Linha de base: sob condições de operação cromatográficas, quando nenhum analito passa pelo detector, a curva do ruído do detector ao longo do tempo é chamada de linha de base. 4. Altura do pico e meia-largura: a altura entre a interseção de uma linha traçada a partir do máximo de concentração do pico e a linha de base é chamada de altura do pico, geralmente expressa como h. A largura na metade da altura do pico é chamada de meia-largura do pico, geralmente expressa como x1/2. 5. Área do pico: a área formada pela curva de eluição (pico cromatográfico) e a linha de base é chamada de área do pico, expressa como A. 6. Tempo morto, tempo de retenção e tempo de retenção corrigido: o tempo desde a injeção até o máximo do pico do gás inerte é chamado de tempo morto, expresso como td. O tempo necessário desde a injeção até o aparecimento do valor mais alto do pico cromatográfico é chamado de tempo de retenção, representado por tr. A diferença entre o tempo de retenção e o tempo morto é chamada de tempo de retenção corrigido. É representada por Vd. 7. Volume morto, volume de retenção e volume de retenção corrigido: o produto do tempo morto pela vazão média do gás portador é chamado de volume morto, representado por Vd, sendo a vazão média do gás portador representada por Fc, Vd=tdxFc. O produto do tempo de retenção pela vazão média do gás portador é chamado de volume de retenção, representado por Vr, Vr=trxFc. 8. Valor de retenção e valor de retenção relativo: o valor de retenção é um valor numérico que representa o tempo de permanência de cada componente da amostra na coluna cromatográfica. É geralmente expresso em tempo ou no volume de gás portador necessário para carregar o componente para fora da coluna cromatográfica. Usando uma substância como padrão, a razão entre o valor de retenção de outras substâncias e esse padrão é chamada de valor de retenção relativo. 9. Ruído do instrumento: a instabilidade da linha de base é chamada de ruído. 10. Corrente de base: em cromatografia de chama de hidrogênio, quando não há injeção, a corrente de base (corrente de fundo) do próprio instrumento é referida como fluxo de base.

6. Quais são os critérios gerais para selecionar um gás portador? Quais são os gases portadores comumente usados em cromatografia gasosa? Resposta: Os gases usados como gases portadores em cromatografia gasosa (GC) devem atender a vários critérios essenciais, incluindo boa estabilidade química, alta pureza, baixo custo, fácil disponibilidade e compatibilidade com o detector empregado. Os gases portadores comumente usados incluem hidrogênio, nitrogênio, argônio, hélio e dióxido de carbono. Cada gás tem suas vantagens e limitações, influenciando a escolha conforme os requisitos analíticos específicos e a natureza das amostras analisadas.

Recentemente, houve uma tendência significativa de substituir o hélio pelo hidrogênio devido ao aumento dos custos e aos desafios de oferta do hélio. O hidrogênio oferece vários benefícios, incluindo sensibilidade melhorada e tempos de análise mais rápidos. Para facilitar essa transição, fabricantes como PEAK, LNI e Hovogen oferecem soluções de geração de hidrogênio no local, permitindo que os laboratórios produzam gás hidrogênio conforme a necessidade. Isso não só resolve as questões de custo, como também garante um fornecimento contínuo de hidrogênio de alta pureza para aplicações em cromatografia gasosa.

7. Por que o gás portador precisa ser purificado? Como deve ser purificado? Resposta: A purificação consiste na remoção de impurezas como matéria orgânica, oxigênio em traços e umidade do gás portador para melhorar sua pureza. O uso de gases impuros como gás portador pode causar falha da coluna, variabilidade da amostra, aumento do ruído de fluxo de base na cromatografia de chama de hidrogênio e linearidade ruim na cromatografia de condutividade térmica. Portanto, o gás portador deve ser purificado. Tratamentos químicos, como cobre ativado, são geralmente usados para remover oxigênio; peneiras moleculares e carvão ativado são usados para remover impurezas orgânicas; e sílica gel e peneiras moleculares são usados para remover umidade.

8. Quais são os métodos de injeção de amostra? Resposta: A separação cromatográfica exige que uma certa quantidade de amostra seja injetada na forma de um "plug" no menor tempo possível. Os métodos de injeção podem ser divididos em: 1. Amostra gasosa: geralmente há quatro métodos de injeção: (1) injeção com seringa (2) injeção com tubo volumétrico (3) injeção de volume fixo (4) injeção automática de gás. Injeção com seringa e injeção automática de gás são comumente usadas. As vantagens da injeção com seringa são flexibilidade e simplicidade, mas a repetibilidade do volume injetado é ruim. A injeção automática de gás usa uma válvula quantitativa para injeção, que tem boa repetibilidade e pode ser operada automaticamente. 2. Amostra líquida: geralmente usa-se uma microseringa para injeção, o que é simples e rápido. Também pode ser usada a injeção automática quantitativa, que tem boa repetibilidade. 3. Amostra sólida: a amostra costuma ser dissolvida em um solvente e então injetada usando o mesmo método da injeção líquida. Injetores para sólidos também são usados.

9. Descreva brevemente os efeitos do comprimento da coluna, do diâmetro interno da coluna, da temperatura da coluna, da vazão do gás portador, da fase estacionária, da injeção e de outras condições operacionais na separação em análise por cromatografia gasosa?

R: As condições operacionais influenciam significativamente as separações cromatográficas. 1. Comprimento e diâmetro interno da coluna: em geral, colunas mais longas melhoram o desempenho de separação, enquanto colunas mais curtas permitem destilação mais rápida. Um diâmetro interno menor resulta em melhor separação, enquanto um diâmetro interno maior aumenta a vazão. No entanto, um diâmetro interno excessivamente grande pode resultar em distribuição desigual do suporte dentro da coluna. Colunas analíticas normalmente têm diâmetro interno de 3-6 mm e comprimento de 1-4 metros.

2. Temperatura da coluna: é uma variável operacional crítica, impactando diretamente a eficiência de separação e a velocidade de análise. A seleção da temperatura da coluna baseia-se na faixa de ponto de ebulição da mistura, na proporção da fase estacionária e na sensibilidade do detector. Aumentar a temperatura da coluna encurta o tempo de análise; diminuir a temperatura aumenta a seletividade da coluna, facilitando a separação dos componentes, melhorando a estabilidade da coluna e prolongando sua vida útil. Uma temperatura de coluna igual ou alguns dez graus acima do ponto de ebulição médio da amostra geralmente é adequada. Temperaturas baixas são usadas para amostras voláteis, enquanto temperaturas altas são usadas para amostras menos voláteis.

3. Vazão do gás portador: a vazão do gás portador é um dos fatores mais importantes na determinação das separações cromatográficas. Em geral, vazões mais altas resultam em picos cromatográficos mais estreitos, enquanto vazões mais baixas resultam em picos mais largos. No entanto, tanto uma vazão alta demais quanto baixa demais podem impactar negativamente as separações. A vazão deve ser estável, com uma faixa típica de 10-100 ml/min sendo o valor ideal.

4. Fase Estacionária: a fase estacionária é composta por um adsorvente sólido ou um suporte revestido com um líquido estacionário. (1) Tamanho de partícula do adsorvente sólido ou suporte: geralmente são usados 40-60 mesh, 60-80 mesh e 80-100 mesh. Com colunas de mesmo comprimento, partículas finas têm melhor eficiência de separação que partículas grossas. (2) Conteúdo de líquido estacionário: o teor de líquido estacionário tem impacto significativo na eficiência de separação. A razão em massa entre o líquido estacionário e o suporte é geralmente de 15%-25%. Uma razão alta demais prejudicará a separação, enquanto uma razão baixa demais causará cauda nos picos cromatográficos.

5. Injeção: em geral, injeções mais rápidas, volumes de injeção menores e temperaturas de injeção mais altas produzem melhores resultados de separação. Para amostras líquidas, a velocidade de injeção deve ser alta, e a temperatura de vaporização deve estar acima do ponto de ebulição dos componentes de alto ponto de ebulição na amostra. Isso garante que os picos cromatográficos não se alarguem, maximizando assim a eficiência da coluna. Dentro de certo limite de volume de injeção, a largura total na metade do máximo (FWHM) do pico cromatográfico permanece constante. Volume de injeção excessivo sobrecarregará a coluna. Em geral, aumentar o comprimento da coluna em quatro vezes dobra o volume de amostra admissível. Para análises de rotina, o volume de injeção para líquidos é de 1-20 μL; para gases, é de 0,1-5 mL.

10. Quais princípios devem ser usados para selecionar materiais de tubulação de coluna cromatográfica? Quais materiais são comumente usados na tubulação de coluna? Resposta: O material da tubulação de coluna cromatográfica deve ser selecionado com base nos seguintes requisitos: 1. Não deve reagir quimicamente com a fase estacionária, a amostra ou o gás portador. 2. Deve ser fácil de processar e moldar. 3. A parede interna da tubulação deve ser lisa, e a seção transversal deve ser uniformemente redonda. A tubulação de coluna cromatográfica é tipicamente em forma de U ou espiral, e é feita principalmente de cobre, aço inoxidável, vidro e outros materiais.

11. Como deve ser tratada uma nova coluna cromatográfica (de cobre ou aço inoxidável) antes do uso? Resposta: Uma nova coluna deve primeiro ser lavada com ácido ou álcali diluído (1:1 de ácido clorídrico ou hidróxido de sódio) para remover óleo e outras sujeiras. Em seguida, enxaguar com água da torneira e depois enxaguar com água destilada até ficar neutra. Por fim, soprar com ar limpo e secar antes do uso.

12. O que é um suporte? Quais são os requisitos de um suporte? R: Um suporte é um sólido poroso e quimicamente inerte usado para sustentar a fase estacionária em cromatografia gasosa. Os requisitos de um suporte são: 1. Uma área de superfície grande, geralmente entre 0,5 e 2 m/g; 2. Inércia química e estabilidade térmica; 3. Resistência mecânica suficiente para evitar fragmentação durante o recobrimento e o empacotamento; 4. Uma estrutura de poros adequada para facilitar a transferência rápida de massa entre as duas fases; 5. A capacidade de formar partículas esféricas uniformes para facilitar a penetração da fase gasosa e o empacotamento uniforme; 6. Excelente molhabilidade para facilitar a distribuição uniforme da fase estacionária. É difícil encontrar um suporte que atenda plenamente a esses requisitos, e na prática, apenas suportes com desempenho relativamente bom podem ser encontrados.

13. Quantos tipos de suporte existem? Quais são suas características? Resposta: Geralmente são divididos em duas categorias: terra diatomácea e terra não diatomácea, e cada categoria tem várias subcategorias. 1. Tipos de terra diatomácea: (1) Branca: pequena área de superfície, solta, frágil, baixa capacidade de adsorção, após tratamento adequado, pode analisar componentes altamente polares; (2) Vermelha: tem grande área de superfície e boa resistência mecânica, mas possui alta capacidade de adsorção. 2. Tipos de terra não diatomácea: (1) Suportes fluorados: boa inércia de superfície, podem ser usados para analisar substâncias altamente polares e corrosivas, mas são difíceis de empacotar na coluna, e a eficiência da coluna é baixa. (2) Microesferas de vidro: pequena área de superfície, usá-las como suporte pode reduzir muito a temperatura da coluna, e a separação é completa e rápida. No entanto, é difícil recobri-las e a eficiência da coluna é baixa. (3) Esferas de polímero poroso: alta resistência mecânica, boa estabilidade térmica, baixa adsorção, resistência à corrosão, alta eficiência de separação, um novo tipo de fase estacionária cromatográfica com desempenho excelente. (4) Peneira molecular de carbono: neutra, grande área de superfície, alta resistência, longa vida de dessorção, e possui vantagens incomparáveis na análise em traços. (5) Carvão ativado: pode ser usado sozinho como fase estacionária. (6) Areia: usada principalmente para separar metais. 14. Quais são os suportes comumente usados? A que categoria pertencem? Resposta: suporte 101: suporte de terra diatomácea branca; suporte 102: suporte de terra diatomácea branca; celite545: suporte de terra diatomácea branca; suporte 201: suporte de terra diatomácea vermelha; suporte 6201: suporte de terra diatomácea vermelha; tijolo refratário C-22: suporte de terra diatomácea vermelha; chromosorb: suporte de terra diatomácea vermelha.

15. Por que o suporte precisa ser tratado antes do uso? Quais são os métodos gerais de tratamento? Resposta: A superfície dos suportes comumente usados não é inerte. Ela possui graus variáveis de atividade catalítica e adsorção (especialmente quando o teor de fase estacionária é baixo e quando se separam substâncias polares), o que pode causar cauda nos picos, redução da eficiência da coluna e alterações nos valores de retenção. Portanto, o pré-tratamento é necessário. Os métodos gerais de tratamento são descritos resumidamente abaixo:

1. Lavagem ácida: aqueça o suporte com ácido clorídrico concentrado por 20-30 minutos e depois enxágue com água da torneira até ficar neutro, enxágue com metanol e seque para uso posterior. Este método remove principalmente impurezas inorgânicas, como o ferro presente na superfície do suporte.

2. Lavagem alcalina: mergulhe ou reflua o suporte em uma solução de hidróxido de sódio a 10% ou de hidróxido de potássio a 5% em metanol. Enxágue com água até ficar neutro, enxágue com metanol e seque para uso posterior. O objetivo da lavagem alcalina é remover sítios ácidos de superfície, como o óxido de alumínio, mas quantidades traços de álcali livre frequentemente permanecem na superfície, o que pode decompor ou adsorver algumas substâncias não alcalinas. Tenha cuidado ao usar essa solução.

3. Silanização: os reagentes de silanização reagem com grupos silanol e sililéter presentes na superfície do suporte para remover a capacidade de ligação de hidrogênio da superfície, melhorando assim o desempenho do suporte. Os reagentes de silanização comumente usados incluem o dimetildiclorosilano e o hexametildisilazano.

4. Vitrificação: mergulhe o suporte a ser tratado em uma solução aquosa de carbonato de sódio-carbonato de potássio (1:1) a 2-3% por um dia. Após secar, calcine a 870°C por 3-5 horas e depois aqueça a 980°C por aproximadamente 40 minutos. Este tratamento forma um esmalte vitrificado na superfície do suporte, dai o nome de "suporte vitrificado". Este suporte apresenta baixa capacidade de adsorção, mas alta resistência. Quando se adiciona uma pequena quantidade de agente de cauda à fase estacionária, ele pode analisar substâncias altamente polares, como álcoois e ácidos. No entanto, a eficiência da coluna para substâncias apolares é ligeiramente reduzida. Além disso, substâncias como metanol e ácido formiático apresentam certo grau de adsorção química irreversível em suportes vitrificados, o que deve ser considerado na análise quantitativa.

5. Outros métodos de purificação: pode ser usado qualquer método que utilize reações químicas para remover sítios ativos ou cobertura física para purificar as propriedades de superfície do suporte.

16. Qual é a malha comumente usada do suporte? Resposta: Para colunas cromatográficas comumente usadas com diâmetro interno de 4-6 mm: para colunas cromatográficas mais longas, a malha do suporte é geralmente de 40-80 mesh; para colunas mais curtas, a malha do suporte é geralmente de 80-100 mesh (o número de furos de peneira por polegada é a mesh).

17. Como escolher um suporte comumente usado? Resposta: Existem muitos suportes diferentes. Entre os suportes de terra diatomácea comumente usados: suportes vermelhos (como 6201, 201) podem ser usados para separar substâncias apolares ou pouco polares. Suportes brancos (como 101) podem ser usados para substâncias polares ou alcalinas. Suportes vermelhos vitrificados (como 301) podem ser usados para substâncias de polaridade média. Suportes brancos silanizados podem ser usados para substâncias altamente polares com ligações de hidrogênio, como na determinação de efluentes. Para separar substâncias ácidas como os fenóis, deve-se usar um suporte lavado com ácido. Para separar substâncias alcalinas como a monoetanolamina, deve-se usar um suporte lavado com álcali. Suportes silanizados são usados para análise em traços. Alguns casos especiais exigem suportes especiais, como suportes fluorados para separar isocianatos. No entanto, em macroanálises comuns, não é preciso ser excessivamente exigente quanto ao suporte; até mesmo pó de tijolo refratário, contas de vidro e areia do mar podem ser usados.

18. O que é uma fase estacionária sólida? Em quantas categorias pode ser aproximadamente dividida? Resposta: Refere-se a um material sólido poroso ativo que é carregado diretamente na coluna cromatográfica como fase estacionária. As fases estacionárias sólidas podem ser aproximadamente divididas em três categorias: a primeira é a categoria dos adsorventes, como peneiras moleculares, sílica gel, carvão ativado e alumina; a segunda é a categoria dos polímeros de alto peso molecular, como as microesferas porosas de alto peso molecular do tipo GDX domésticos e a série Porapak estrangeira; a terceira é a categoria das fases estacionárias quimicamente ligadas. Em cromatografia gasosa, o líquido estacionário geralmente é depositado sobre a superfície do suporte. O uso de fases estacionárias quimicamente ligadas para analisar substâncias polares ou apolares costuma produzir picos simétricos, alta eficiência de coluna e melhor estabilidade térmica da fase estacionária.

19. O que é uma fase estacionária? Quais são os requisitos de uma fase estacionária? Resposta: É geralmente um filme líquido de um composto orgânico de alto ponto de ebulição que separa os componentes na coluna cromatográfica interagindo com as diferentes moléculas dos distintos componentes. Em geral, exige-se o seguinte para uma fase estacionária usada em cromatografia gasosa: 1. Baixa pressão de vapor na temperatura de operação, boa estabilidade térmica e ausência de reações irreversíveis com o analito ou o gás portador; 2. Líquido na temperatura de operação, e quanto menor a viscosidade, melhor. A transferência de massa em uma fase estacionária de alta viscosidade é lenta, reduzindo a eficiência da coluna. Isso determina a temperatura mínima de operação da fase estacionária; 3. Deve aderir firmesente ao suporte e formar uma camada fina, uniforme e estruturalmente estável; 4. As substâncias a serem separadas devem ter certa solubilidade na fase; caso contrário, serão rapidamente carregadas pelo gás portador e incapazes de se particionar entre as duas fases; 5. Deve ser capaz de separar substâncias com pontos de ebulição próximos mas de tipos diferentes, ou seja, deve reter mais um tipo de composto do que outro. Essa capacidade de separação é conhecida como seletividade da fase estacionária.

20. Quais são os princípios para selecionar uma fase estacionária? Resposta: Com base nas interações entre os componentes a serem separados e as moléculas da fase estacionária, a seleção de uma fase estacionária baseia-se geralmente no chamado "princípio da similaridade". Este refere-se às similaridades entre as propriedades da fase estacionária e dos componentes a serem separados, como grupos funcionais, ligações químicas, polaridade e certas propriedades químicas. Quando as propriedades são similares, a interação entre as duas moléculas é mais forte, a solubilidade dos componentes separados na fase estacionária é maior, o coeficiente de partição é maior e, portanto, o tempo de retenção é maior. Reciprocamente, quando a solubilidade é menor e o coeficiente de partição é menor, os componentes eluem rapidamente da coluna. A seguir, discutem-se diferentes situações: a. Separar compostos polares, usando uma fase estacionária polar. Nesse caso, as interações entre os componentes da amostra e as moléculas da fase estacionária são principalmente direcionais e indutivas. Os picos dos componentes eluem em ordem de polaridade, com os componentes menos polares eluindo primeiro e os mais polares mais tarde. b. Separar compostos apolares, usando uma fase estacionária apolar. As interações entre os componentes da amostra e as moléculas da fase estacionária são forças de dispersão, sem seletividade particular. Nesse caso, os componentes eluem em ordem de ponto de ebulição, com o pico de menor ponto de ebulição aparecendo primeiro. A eficiência de separar isômeros com pontos de ebulição semelhantes é muito baixa. c. Ao separar misturas de compostos apolares e polares, pode-se usar uma fase estacionária polar. Nesse caso, o componente apolar destila primeiro. Quanto mais polar a fase estacionária, mais fácil é o componente apolar escoar. d. Para amostras que podem formar ligações de hidrogênio, como álcoois, fenóis, aminas e água, geralmente se escolhem fases estacionárias polares ou de ligação de hidrogênio. A separação baseia-se na capacidade de formar ligações de hidrogênio entre os componentes e as moléculas da fase estacionária. O "princípio da compatibilidade semelhante" é um princípio geral para selecionar fases estacionárias. Às vezes, quando as fases estacionárias existentes não conseguem alcançar resultados de separação satisfatórios, costuma-se usar uma "fase estacionária mista". Duas ou mais fases estacionárias com propriedades diferentes, misturadas em proporções apropriadas, são usadas para obter uma seletividade de separação relativamente satisfatória sem prolongar o tempo de análise. No entanto, no trabalho real, a seleção de fases estacionárias é frequentemente baseada em exemplos apresentados em materiais de referência ou literatura.

21. Quantos métodos existem para tratar fases estacionárias mistas? Resposta: Existem três métodos para tratar fases estacionárias mistas: 1. Aplicar cada uma ao suporte separadamente e depois misturar; 2. Misturar as fases estacionárias antes de aplicar, garantindo que todas as fases estacionárias usadas estejam dissolvidas no mesmo solvente; 3. Aplicar cada fase separadamente, depois carregar cada fase em uma coluna cromatográfica de comprimento proporcional e, em seguida, conectá-las em série. Os resultados desses três métodos são geralmente os mesmos, mas alguns podem diferir para separações específicas.

22. Qual é a quantidade apropriada de líquido estacionário aplicado? Resposta: Como o teor de líquido estacionário afeta significativamente a eficiência de separação, a razão em massa mínima entre o líquido estacionário e o suporte é de 5%, sendo geralmente usados 15%-25%. Uma razão de líquido mais alta fará com que a amostra analisada se difunda através do filme líquido mais espesso, prejudicando a separação. Se a razão de líquido for baixa demais, o filme líquido mais fino fará com que a adsorção residual na superfície do suporte se manifeste, resultando em cauda nos picos cromatográficos. Como uma razão de líquido baixa favorece o equilíbrio, pode-se usar uma vazão de gás portador mais alta. Portanto, usar uma razão de líquido baixa e uma pequena quantidade de amostra pode encurtar o tempo de análise. Para suportes de terra diatomácea, o teor de líquido estacionário pode chegar a 15-30%. Devido à menor área de superfície dos suportes fluorados, o máximo permitido é 10%. Para microesferas de vidro, devido à sua área de superfície extremamente pequena, o teor de líquido estacionário só pode ser mantido em torno de 0-25%.

23. Quais são os solventes de fase estacionária comumente usados no preparo de colunas? Quais são os princípios para selecionar solventes? Resposta: Os solventes comumente usados incluem metanol, etanol, éter, acetona, n-butanol, n-hexano, éter de petróleo, benzeno, tolueno e clorofórmio. Os princípios de seleção são: 1. Boa solubilidade, 2. Nenhuma reação química com a fase estacionária, 3. Baixo ponto de ebulição e 4. Baixa toxicidade.

24. Qual é o método convencional para recobrir um suporte com uma fase estacionária ao preparar uma coluna? Resposta: Para a maioria das colunas cromatográficas comumente usadas, usa-se o método de recobrimento "convencional". O procedimento simples é: tomar a quantidade requerida de fase estacionária, dissolvê-la em uma quantidade adequada de solvente (o suficiente para molhar o suporte), verter lentamente o suporte na solução, agitando à medida que é adicionado, e então irradiar com uma lâmpada infravermelha (ou evaporar em banho-maria) para eliminar o solvente. A fase estacionária então se adhirá ao suporte.

25. Quais são os métodos comuns para preencher colunas cromatográficas? Resposta: A qualidade do preenchimento da fase estacionária afeta diretamente a eficiência da coluna. O preenchimento por bomba é comumente usado. Isso envolve tampar uma extremidade da coluna com lã de vidro, conectá-la a uma bomba de vácuo e prender um funil na outra extremidade. A fase estacionária é adicionada sob vácuo, batendo-se a coluna durante o preenchimento até que nenhuma fase estacionária mais entre. Uma vez preenchida, a coluna é tampada com lã de vidro. O empacotamento da coluna exige preenchimento uniforme e compacto, sem lacunas.

26. Por que as colunas cromatográficas recém-instaladas precisam ser condicionadas por um período antes do uso? Resposta: Depois de conectar uma coluna cromatográfica recém-instalada ao instrumento, ela deve primeiro ser submetida a teste de pressão e teste de vazamento, e depois purgada com gás portador a temperatura constante por várias horas antes de ser submetida à análise. Isso é geralmente chamado de processo de condicionamento da coluna. O objetivo do condicionamento é remover solventes residuais, impurezas de baixo ponto de ebulição e fases estacionárias de baixo peso molecular, estabilizando a linha de base do registrador. A temperatura de condicionamento também permite que a fase estacionária se redistribua na superfície do suporte, resultando em um recobrimento mais uniforme e firme. Após um período de condicionamento, a eficiência e o desempenho da coluna cromatográfica instalada se estabilizam antes do uso.

27. Quais são os sintomas de uma coluna cromatográfica com falha? Qual é a causa da falha? Resposta: As principais manifestações de falha da coluna cromatográfica são separação cromatográfica ruim e tempos de retenção dos componentes significativamente encurtados. Os principais motivos de falha da coluna cromatográfica são: para a cromatografia gasoso-sólida, é a atividade ou as propriedades de adsorção reduzidas da fase estacionária; para a cromatografia gasoso-líquida, é a perda gradual do líquido estacionário durante o uso. 28. Condicionamento de colunas capilares : O objetivo do condicionamento: a fase estacionária de uma coluna de cromatografia gasosa costuma estar distribuída na forma de um recobrimento no interior da parede do tubo da coluna (coluna capilar) ou sobre a superfície do suporte (coluna empacotada). Para uma nova coluna de cromatografia gasosa, a fase estacionária externa muitas vezes está fracamente ligada ao suporte. Quando usada em temperaturas elevadas, ela se perde lentamente, causando flutuações na linha de base e aumento do ruído. Para evitar esse fenômeno, pode-se pré-aquecer a uma temperatura mais alta (em geral, a temperatura de tolerância da coluna) por um período, para evaporar a fase estacionária fracamente ligada, evitando assim interferência na análise subsequente. Além disso, operações de condicionamento podem ser realizadas em colunas de cromatografia gasosa que já foram usadas por um longo período, para remover contaminantes residuais na coluna.

Eleve a temperatura da coluna a uma temperatura constante, normalmente seu limite superior de temperatura. Em circunstâncias especiais, a temperatura pode ser elevada a aproximadamente 10-20°C acima da temperatura de operação. No entanto, o limite de temperatura da coluna não deve ser excedido, pois isso pode danificar a coluna. Evite também definir a rampa de temperatura muito lentamente. Uma vez atingida a temperatura de condicionamento, registre e observe a linha de base. Amplie a linha de base para facilitar a observação. Inicialmente, a linha de base deve continuar subindo e então começar a cair de 5 a 10 minutos após atingir a temperatura de condicionamento, por mais 30-90 minutos. Uma vez que atinja um valor fixo, a linha de base estabiliza. Se a linha de base permanecer estável após 2-3 horas ou não mostrar tendência clara de queda após 15-20 minutos, pode haver um vazamento ou contaminação no sistema. Nesse caso, reduza imediatamente a temperatura da coluna para abaixo de 40°C, inspecione o sistema e resolva os problemas o mais rápido possível. Continuar o processo de condicionamento não só danificará a coluna, como também impedirá que uma linha de base estável seja alcançada. Além disso, o tempo de condicionamento deve ser limitado, pois isso encurtará a vida útil da coluna. Em termos gerais, colunas com fases estacionárias polares e recobrimentos mais espessos exigem tempos de condicionamento mais longos, enquanto colunas com fases estacionárias menos polares e recobrimentos mais finos exigem tempos de condicionamento mais curtos. Os métodos de condicionamento para colunas PLOT variam; consulte as instruções de operação da coluna para os passos específicos. Se o condicionamento for realizado antes de a coluna ser conectada a um detector, a extremidade distal da coluna pode ser danificada. É importante cortar os 10-20 cm distais da coluna antes de conectá-la ao detector. O limite de temperatura é a faixa dentro da qual a coluna pode operar normalmente. Operar abaixo do limite inferior de temperatura resulta em separação e formato de pico subótimos, mas isso não prejudica a coluna em si. O limite superior de temperatura costuma ter dois valores. O valor inferior é o limite isotérmico. Nessa temperatura, a coluna pode ser operada normalmente sem um limite de duração específico. O valor mais alto é o limite de temperatura programada. Este limite de temperatura é normalmente mantido por no máximo dez minutos. Operar acima do limite superior de temperatura encurtará a vida útil da coluna.

29. Diagnóstico de deriva da linha de base: A deriva da linha de base ocorre frequentemente quando se usa temperatura programada em um GC. Esse fenômeno é normalmente causado por: sangramento da coluna, sangramento do liner de injeção, contaminação do injetor ou do detector e alterações na vazão de gás. Se for usado um detector de alta sensibilidade, mesmo um leve sangramento de coluna ou contaminação do sistema pode causar deriva significativa da linha de base. Para melhorar a confiabilidade da análise qualitativa e quantitativa, a deriva da linha de base deve ser minimizada ou eliminada tanto quanto possível. Para determinar a origem da deriva da linha de base: primeiro, remova a coluna do cromatógrafo, bloqueie a entrada do detector e observe a deriva da linha de base durante o aumento da temperatura programada. Se a linha de base estiver instável, a contaminação vem do detector (para soluções, consulte "Como reduzir a contaminação do detector"); se a linha de base estiver estável, isso prova que o detector está em boas condições. Nesse momento, use um pequeno trecho de tubo de quartzo fundido para conectar o injetor e o detector, execute um programa de rampa de temperatura e observe a deriva da linha de base. Isso reflete a contaminação do injetor. Se a linha de base estiver instável, pode-se determinar que o problema vem da porta de injeção (para soluções, consulte "Como reduzir a contaminação do injetor"); se a linha de base estiver estável, isso prova que nem o detector nem a porta de injeção estão contaminados. Nesse momento, reinstale a coluna e execute o mesmo programa de rampa de temperatura para determinar se a deriva da linha de base é causada pela perda da coluna.

30. Como reduzir a deriva da linha de base causada por amostras e injetores? Se houver substâncias não voláteis de alto peso molecular remanescentes na coluna cromatográfica, é provável que ocorra deriva da linha de base durante o aumento da temperatura programada. Isso ocorre porque essas substâncias são fortemente retidas e se movem lentamente na coluna. Você pode usar o método de recondicionamento para expulsar da coluna esses componentes fortemente retidos, mas esse método aumenta a possibilidade de oxidação do líquido estacionário. Além disso, você também pode usar solvente para enxaguar a coluna cromatográfica (leia as precauções de uso da coluna antes de enxaguar, para selecionar um solvente adequado); você também pode instalar uma coluna de guarda para evitar que problemas ocorram. Se a deriva da linha de base for causada por contaminação do injetor, ela pode ser resolvida substituindo o liner, a almofada de injeção e o anel de vedação, e enxaguando a porta de injeção com solvente. Após a manutenção, use um trecho de tubo de quartzo fundido para conectar o injetor e o detector, e injete uma amostra em branco para confirmar que o injetor está limpo.

31. Como posso reduzir a deriva da linha de base do detector? A deriva da linha de base do detector é frequentemente causada por pequenas quantidades de hidrocarbonetos no gás makeup ou no gás combustível. Usar um purificador de gás de alta pureza para tratar o gás makeup ou o gás combustível pode reduzir essa deriva. Usar um gerador de gás de alta pureza pode melhorar a estabilidade da linha de base do FID. A manutenção adequada do detector, incluindo limpeza regular, também pode reduzir essa deriva.

32. Como posso reduzir a deriva da linha de base causada por sangramento da coluna? Antes de usar uma coluna nova, condicione-a da seguinte forma para minimizar o sangramento da coluna: condicione-a a uma temperatura 20°C acima da temperatura experimental de operação ou na temperatura de operação da coluna (a que for menor). Um condicionamento mais longo em temperatura baixa é mais eficaz do que um condicionamento mais curto em temperatura alta. Se o gás portador contiver pequenas quantidades de oxigênio ou umidade, ou se houver vazamentos na linha de gás, a fase estacionária pode oxidar-se facilmente em temperaturas altas, causando sangramento da coluna e deriva da linha de base. Uma vez oxidada a fase estacionária, ela deve ser condicionada por várias horas com gás portador de alta pureza para nivelar a linha de base.

33. Ausência de pico 1. A chama do detector FID se apagou 2. O grau de vaporização do injetor é muito baixo e a amostra não pode ser vaporizada 3. A temperatura da coluna está muito baixa, causando a condensação da amostra na coluna cromatográfica 4. A porta de injeção está com vazamento 5. A entrada da coluna está com vazamento ou obstruída 6. Há um problema com a agulha de injeção e a amostra não pode ser coletada.

34. Todos os picos dos componentes são pequenos ou estão ficando menores. Possíveis causas e medidas recomendadas: 1. Agulha de injeção defeituosa. Use uma agulha nova. 2. Vazamento após a injeção. Determine o ponto de vazamento. 3. A razão de split está muito alta. 4. O peso molecular do analito é muito grande. Aumente a temperatura da porta de injeção. 5. O NPD está coberto por contaminantes (sílica). Substitua a pérola. 6. A temperatura do NPD está muito alta (operacional ou ambiente). O gás está impuro. Substitua a pérola. Evite operar em temperatura alta. 7. O detector não é compatível com a amostra.

35. Extensão do pico 1. A extensão do pico é frequentemente causada por sobrecarga da coluna. Reduza o volume de injeção e use uma coluna de maior capacidade. 2. Aumente as temperaturas do OVEN e da INJ. 3. Aumente a vazão do gás portador. 4. Domine a técnica de injeção. 5. A amostra anterior se aglomerou na coluna e não foi totalmente descarregada a tempo. 6. A amostra reagiu com o suporte da fase estacionária.

36. Altura de pico e área de pico não são repetíveis 1. A injeção não é repetível, com grande desvio 2. Desalinhamento de pico causado por alterações na forma de outros picos 3. Interferência na linha de base 4. Alterações nos parâmetros do sistema do instrumento, padronização de parâmetros e normalização 5. Alterações no desempenho da coluna cromatográfica

37. Baixa repetibilidade da sensibilidade durante injeções consecutivas. Em condições de injeção contínua, a área do pico flutua e a precisão da medição é baixa. As razões são: 1. Técnica de injeção deficiente 2. Vazamento de gás portador ou vazão instável 3. Contaminação do detector 4. Contaminação da coluna ou do liner. Limpe o liner e a coluna com solvente (metanol de alto grau): substitua (se necessário) 5. Vazamento da seringa 6. O volume de injeção excede a faixa linear do detector, causando sobrecarga do detector.

38. Cauda do pico 1. O liner ou a coluna está contaminado ou instalado incorretamente. Existe volume morto. Se houver cauda ao injetar metano, reinstale-o. 2. A temperatura do injetor está muito alta. 3. A cabeça da coluna está irregular. Corte-a com diamante. 4. A polaridade da fase estacionária não corresponde à amostra. Substitua a coluna por uma adequada. 5. Existe um poço frio no trajeto do fluxo da amostra. Elimine a zona de baixa temperatura no trajeto. 6. Há detritos acumulados no liner ou na coluna. Limpe e substitua o liner. Corte 10 cm da cabeça da coluna. 7. A injeção...

39. Separação reduzida 1. Contaminação da coluna 2. Dano da fase estacionária (sangramento da coluna) 3. Falha de injeção Verifique se há vazamentos 4. Verifique a adequação de temperatura e o liner 5. A concentração da amostra está muito alta: dilua, reduza o volume de injeção, use uma razão de split alta

40. Alargamento do pico de solvente 1. Falha na instalação da coluna 2. Vazamento de injeção 3. Volume de injeção alto: aumente a temperatura de vaporização 4. Razão de split baixa: aumente a razão de split 5. Temperatura de coluna baixa 6. OVEN inicial muito alto durante a injeção com split: reduza a temperatura inicial da coluna e use um solvente de alto ponto de ebulição 7. Tempo de purga muito longo (injeção sem split): defina um procedimento de purga curto

41. A linha de base deriva para baixo 1. Uma coluna recém-instalada tem uma linha de base que continua derivando para cima por vários minutos. Continue o condicionamento. 2. O detector não atingiu o equilíbrio. Prolongue o tempo de equilíbrio do detector. 3. Há depósitos que foram eliminados do detector ou de outras partes do sistema GC. Limpe-os.

42. A linha de base deriva para cima 1. A fase estacionária da coluna cromatográfica está danificada 2. A vazão do gás portador diminui: ajuste a pressão do gás portador

43. Ruído 1. A coluna capilar foi inserida profunda demais no detector. Reinstale a coluna. 2. O ruído na linha de base é causado por vazamento de gás ao usar ECD ou TCD. Verifique e repare a linha de gás. 3. Vazão de gás inadequada ou escolha de gás incorreta para FID, NPD ou FPD. Ajuste a vazão do gás de alta pureza. 4. A entrada está contaminada. Limpe a entrada, substitua a prateleira e substitua a fibra de vidro no liner. 5. A coluna capilar está contaminada. Corte 10 cm da primeira extremidade, limpe a coluna com solvente e substitua-a. 6. O detector está com mau funcionamento.

44. Alguns métodos para melhorar a separação: 1. Aumentar o comprimento da coluna pode aumentar a separação. 2. Reduzir o volume de injeção (aumentando o volume de solvente para amostras sólidas). 3. Melhorar a técnica de injeção para evitar injeções duplas. 4. Reduzir a vazão do gás portador. 5. Abaixar a temperatura da coluna. 6. Elevar a temperatura do vaporizador. 7. Reduzir o volume morto do sistema, por exemplo, garantindo que as conexões da coluna estejam totalmente inseridas e usando um vaporizador sem split para injeção sem split. 8. Dividir colunas capilares e selecionar uma razão de split apropriada são essenciais. Em resumo, isso deve ser explorado experimentalmente com base em circunstâncias específicas. Por exemplo, reduzir a vazão do gás portador...

45. Como posso determinar se uma coluna está totalmente condicionada? O detector FID é o mais indicado para monitorar a linha de base durante o condicionamento da coluna. No final da rampa de temperatura, a linha de base aumenta, depois diminui gradualmente e estabiliza; nesse ponto, considera-se que a coluna está totalmente condicionada. Quando a coluna é exposta a temperaturas altas, sua vida útil diminui drasticamente. Se um sangramento significativo da coluna persistir por mais de duas horas durante o condicionamento, resfrie a coluna até a temperatura ambiente e identifique as fontes de sangramento, como infiltração de oxigênio, vazamentos da septo e resíduos do instrumento. Sangramento da coluna: após condicionar a coluna, faça um teste de sangramento. Execute uma rampa de temperatura sem injetar amostra.

46. Análise das causas de extinção da chama ou falha de ignição do Detector de Ionização de Chama (FID): ① Condensação. Como a água é formada durante o processo de combustão do FID, a temperatura do detector deve ser mantida acima de 100°C para evitar a condensação. Se o detector não tiver sido ligado por um período prolongado, é necessário um longo período de bakeout antes da ignição. ② A vazão da coluna está muito alta. Se for necessário usar uma coluna de grande diâmetro interno, reduza a vazão do gás portador por tempo suficiente para permitir a ignição do FID. ③ Verifique se o tipo de bico instalado é adequado para a coluna em uso e verifique se há obstrução no bico.

47. Cilindros de gás e seu uso

1. Os cilindros de gás são recipientes de alta pressão para armazenar gás comprimido. Sua capacidade é geralmente de 40 a 60 L, com uma pressão máxima de trabalho de 15 MPa (150 atm) e um mínimo acima de 0,6 MPa (6 atm). Os cilindros de gás de alta pressão padronizados são fabricados de acordo com normas nacionais e devem ter as seguintes marcações no ombro do cilindro: fabricante, data de fabricação, modelo e número do cilindro, peso do cilindro, volume de gás, pressão de trabalho, pressão de teste hidrostático, data do teste hidrostático e data da próxima inspeção.

Como os cilindros de gás contêm altas pressões e alguns gases são tóxicos, inflamáveis ou explosivos, para garantir a segurança e evitar confusão entre os diversos cilindros, eles devem ser pintados com uma cor específica e indicar claramente o nome do gás contido. Consulte as Tabelas 1-3 para as marcações de vários cilindros de gás.

Tabelas 1-3 Marcações de vários cilindros de gás

Tipo de gás	Cor do cilindro	Cor da marcação	Tipografia	Cor da faixa
Nitrogênio	preto	amarelo	Nitrogênio (N 2 )	Marrom
oxigênio	Azul céu	preto	Oxigênio (O 2 )
hidrogênio	verde escuro	vermelho	Hidrogênio (H 2 )	vermelho
Ar comprimido	preto	branco	Ar comprimido
Acetileno	branco	vermelho	Acetileno (C 2 H 2 )	verde
Argônio bruto	preto	branco	Argônio bruto	branco
Argônio puro	Cinza	verde	Argônio puro

2. Precauções no uso de cilindros de aço (1) Os cilindros de aço devem ser enviados regularmente aos órgãos competentes para inspeção. Somente os que passam na inspeção podem ser preenchidos. Cilindros de aço preenchidos com gases gerais devem ser inspecionados a cada três anos, e os preenchidos com gases corrosivos a cada dois anos. (2) Ao transportar cilindros de aço, use a tampa do cilindro e as faixas de borracha superior e inferior, e manuseie-os com cuidado. Não role, bata, deixe cair nem sacuda violentamente no chão, para evitar explosão. Ao posicionar e usar cilindros de aço, eles devem ser fixados com um suporte ou arame. (3) Os cilindros de aço devem ser guardados em local fresco e seco, longe de fontes de calor, com boa ventilação, evitando chamas abertas e luz solar. Quando o cilindro é aquecido, o gás se expande e a pressão dentro do cilindro aumenta, o que pode facilmente causar vazamento ou até explosão. Cilindros de gás combustível e de oxigênio devem ser guardados em salas separadas. Os cilindros de hidrogênio são melhor colocados em um pequeno ambiente dedicado fora do edifício para garantir a segurança. (4) Ao usar cilindros de aço, exceto para dióxido de carbono e amônia, são geralmente necessárias válvulas redutoras de pressão. Entre as diversas válvulas redutoras de pressão, exceto as válvulas de nitrogênio e oxigênio, que podem ser usadas de forma intercambiável, as demais só podem ser usadas para gases especificados, a fim de evitar explosão. Ao instalar a válvula redutora de pressão, ela deve ser rosqueada com cuidado, normalmente 7 voltas de rosca (comumente conhecidas como 7 threads). Gases propensos a polimerização (como acetileno e etileno) devem ter um prazo de armazenamento especificado para evitar armazenamento por longos períodos. (5) Para gases inflamáveis como hidrogênio e acetileno, a válvula do cilindro é de "rosca reversa" (rosca à esquerda), ou seja, é apertada no sentido anti-horário; para gases não inflamáveis ou de suporte à combustão, como oxigênio e nitrogênio, a válvula do cilindro é de "rosca à direita", ou seja, é apertada no sentido horário. (6) Nunca permita que óleo, graxa ou outras substâncias inflamáveis ou orgânicas fiquem aderentes ao cilindro de oxigênio, especialmente na boca da válvula e na válvula redutora de pressão. Não use algodão, linho ou outros materiais para tampar vazamentos, a fim de evitar acidentes causados por combustão. (7) Preste atenção em proteger a válvula do cilindro. Ao abrir e fechar a válvula, primeiro descubra a direção e então gire-a lentamente, caso contrário a rosca será danificada. Ao abrir a válvula, as pessoas devem ficar do outro lado da válvula redutora de pressão, para evitar que a válvula seja ejetada e cause ferimentos. A válvula deve ser totalmente fechada após cada uso. (8) Cilindros que armazenam gases inflamáveis devem possuir um dispositivo de prevenção de retorno de chama. Algumas válvulas redutoras de pressão já possuem esse dispositivo; você também pode preencher a tubulação de gás com tela de fio fino para evitar o retorno de chama; adicionar um dispositivo de selo líquido à tubulação de gás também pode exercer um papel protetor eficaz. (9) Não use todo o gás do cilindro. Certifique-se de manter uma pressão residual superior a 0,05 MPa (pressão do manômetro da válvula redutora). Gases inflamáveis (como acetileno) devem ter pressão residual de 0,2 a 0,3 MPa, e o hidrogênio deve ter pressão residual de 2 MPa, para evitar perigo ao reabastecer. Os cilindros devem ser fechados após o uso e verificados com frequência. (10) Assim que uma válvula vazar, o cilindro deve ser movido imediatamente para fora, a fim de evitar acidentes em ambientes fechados. 3. Precauções no uso de hidrogênio e acetileno (1) Hidrogênio. Se liberado rapidamente de um cilindro, ele pode pegar fogo mesmo sem uma fonte de ignição. A faixa de explosão de uma mistura de hidrogênio e ar é muito ampla. Quando o teor de hidrogênio está entre 4,0% e 75,6% (razão de volume), explodirá quando exposto ao fogo. Portanto, o hidrogênio deve ser usado em uma área bem ventilada, ou dutos de exaustão devem ser usados para evacuar o gás interno para fora tanto quanto possível. (2) Acetileno. É extremamente inflamável e possui temperatura de combustão muito alta. Também pode se decompor e explodir. A faixa de explosão do acetileno misturado ao ar é de 2,5% a 80,5% (razão de volume). Portanto, fogo de artifício deve ser estritamente proibido para evitar vazamentos de gás.

Manutenção preventiva e ações corretivas do GC: Sempre que um sistema cromatográfico for contaminado com substâncias de alto ponto de ebulição, particularmente na entrada, pode-se esperar uma deterioração do desempenho cromatográfico. Os analistas devem executar a manutenção rotineira do instrumento, incluindo a troca regular da septo, a limpeza e o condicionamento do liner da entrada e, se necessário, o corte de 0,5 a 1 μm da coluna capilar a partir da entrada. Se a degradação do desempenho cromatográfico e os picos fantasma persistirem, pode ser necessária a limpeza das superfícies metálicas da entrada. As colunas capilares são confiáveis e fáceis de usar, mas, para garantir um bom desempenho de separação, procedimentos específicos exigem atenção:

(1) O contato entre a coluna capilar e a parede do forno cromatográfico pode afetar o desempenho cromatográfico e a vida útil da coluna;

(2) Deve-se ter cuidado para impedir que oxigênio entre na coluna capilar;

(3) A septo de injeção só pode ser substituída depois que o forno cromatográfico tiver esfriado;

(4) Antes de aquecer novamente o forno cromatográfico, a coluna cromatográfica deve ser enxaguada com gás portador por 15 min;

(5) Deve-se usar um tubo de desoxigenação para remover o oxigênio em traços do gás portador, e o tubo de desoxigenação deve ser substituído regularmente;

(6) Independentemente de o forno cromatográfico estar aquecendo ou não, o gás portador deve fluir através da coluna cromatográfica.

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